A maioria das técnicas de diagnóstico de câncer depende de procedimentos invasivos e desconfortáveis, como biópsias, endoscopias ou mamografias. Amostras de sangue podem ser uma opção menos desagradável, embora apenas algumas formas da doença possam atualmente ser diagnosticadas dessa maneira. Mas agora, pesquisadores relatando em Sensores ACS desenvolveram um método fácil de usar que pode detectar pequenas quantidades de moléculas relacionadas ao câncer em exossomos no plasma e distinguir efetivamente entre amostras malignas e benignas.
Os exossomos são pequenas vesículas que se soltam de uma célula hospedeira, transportando cargas, como ácidos nucléicos, lipídios e proteínas, em seu interior. Isso significa que eles fornecem uma janela para a condição da célula de onde se originaram. Consequentemente, o ambiente intracelular único das células cancerígenas será refletido em seus exossomos por meio de biomarcadores como micro RNAs (miRNAs). Estes são ácidos nucléicos muito pequenos, com apenas alguns nucleotídeos de comprimento, que regulam a expressão de proteínas nas células e podem se tornar desregulados em tumores. Portanto, é possível que um exame de sangue possa algum dia detectar células cancerígenas simplesmente visando esses miRNAs exossomais.
Mas quantificar os miRNAs tem sido difícil porque eles estão presentes em níveis muito baixos nos exossomos, exigindo processos trabalhosos que podem introduzir contaminação e relatar resultados não confiáveis. Assim, alguns pesquisadores analisaram RNA e proteínas em vesículas com a ferramenta de edição de genes CRISPR. Mas Hua Gao, Kaixiang Zhang e seus colegas queriam desenvolver uma maneira de detectar o pequeno número de miRNAs exossomais relacionados ao câncer usando um sistema CRISPR diferente com uma atividade única de RNase que fosse sensível, confiável e eficaz.
Para criar o método de detecção, a equipe projetou um sistema CRISPR/Cas13a para separar um fluoróforo e uma molécula repórter marcada com supressor e, em seguida, embalá-lo em um lipossoma – essencialmente uma versão fabricada de um exossomo. Quando os dois tipos de compartimentos se fundem, a carga CRISPR interage com o material genético exossomal. Se a sequência de miRNA alvo estivesse presente, a proteína Cas13a tornava-se ativada e separava a molécula repórter, produzindo um sinal fluorescente. Nesses experimentos, a equipe mirou no miRNA-21, que está envolvido no desenvolvimento de várias doenças, incluindo o câncer de mama. O método detectou com sucesso esse miRNA dentro de uma mistura de sequências semelhantes com alta sensibilidade. Em outros experimentos, os pesquisadores testaram o método em um grupo de exossomos de células humanas saudáveis e grupos derivados de células de câncer de mama. O sistema diferenciou consistentemente os exossomos relacionados ao câncer daqueles derivados de células saudáveis, mostrando que poderia ser útil como um diagnóstico de câncer. Os pesquisadores dizem que esse método tem o potencial de tornar o diagnóstico e o monitoramento do câncer mais rápido e fácil, analisando amostras de sangue.
Os autores reconhecem o financiamento da Fundação Nacional de Ciências Naturais da China, da Fundação de Ciências de Pós-Doutorado da China, dos Programas para Talentos de Inovação em Ciência e Tecnologia nas Universidades da Província de Henan e Jovens Talentos Extraordinários na Província de Henan.
Com informações de Science Daily.